技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2020-525
2020-519
人源細(xì)胞系作為體外模型而被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究。正確數(shù)據(jù)的獲得常依賴于細(xì)胞系的特性,尤其是當(dāng)它用來替代其來源者的組織時。人源細(xì)胞系常規(guī)培養(yǎng)傳代流程:(1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?-2min)(2)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存(3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中...
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2020-59
特級胎牛血清清需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。血清在動物細(xì)胞培養(yǎng)中起著多方面的作用可以概括為:①提供細(xì)胞生存和增殖所必需的生長調(diào)節(jié)因子。②補(bǔ)充基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量不足的營養(yǎng)成分。③含有一些可供貼壁細(xì)胞型細(xì)胞貼壁生長的基質(zhì)成分。④提供載體蛋白,可結(jié)合維生素、脂質(zhì)、金屬離子等。⑤在一些情況下,中和毒性物質(zhì)保護(hù)細(xì)胞...
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2020-56
能夠調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的生理功能的細(xì)胞因子是由細(xì)胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質(zhì)。細(xì)胞因子及其受體的濃度可反映疾病病理變化過程,通過細(xì)胞因子檢測以及可溶性受體的水平的檢測,可以評價不同藥物治療疾病的效果。細(xì)胞因子是由活化的淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞及一些基質(zhì)、內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的一類非抗體、非補(bǔ)體的可溶性物質(zhì)。干擾素(IFN)是宿主細(xì)胞受病毒感染后產(chǎn)生的一種非特異性防御因子,具有抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、控制細(xì)胞增殖的作用。進(jìn)行細(xì)胞因子檢測可以判斷機(jī)體免疫功能,對于疾病的診斷...
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2020-429
1.如何選用培養(yǎng)基?培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng),各種目的無血清培養(yǎng)的是AIMV培養(yǎng)基(SFM)。2.為什么要熱滅活血清?加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在進(jìn)行免疫學(xué)研究、培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,推薦使用熱滅活血清。3.L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?...
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