澳洲源胎牛血清質量檢定指標

1、澳洲源胎牛血清內毒素檢測：凝膠法和動態(tài)濁度法要求內毒素含量≤10EU/ml。2、化學檢定：包括滲透壓(240~340)、pH(7.0~8.0)、總蛋白含量(3.5~5.0%)、血紅蛋白(≤0.02%)。3、澳洲源胎牛血清微生物檢查：細菌和真菌——直接培養(yǎng)法、噬菌體——噬斑法和增殖法支原體——培養(yǎng)法和DNA染色法、牛病毒——細胞培養(yǎng)法。要求均為陰性。4、促細胞生長測定：(SP2/0-Ag14標準規(guī)定)a.大增殖濃度≥1.0×106個/ml、倍增時間≤20小時克隆率=(陽性孔...

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貼壁/懸浮細胞瞬時轉染-RFect質粒DNA轉染操作步驟和注意事項

本文以RFectPlasmidDNATransfectionReagent（RFect質粒DNA轉染試劑盒），作為攜帶質粒穿膜的載體物質，具體介紹DNA轉染方法。圖.用本產品4ul轉染1ugpEGFP-C2質粒到293T細胞后，綠色熒光蛋白的表達情況。貼壁/懸浮細胞瞬時轉染-RFect質粒DNA轉染方法步驟:一、貼壁/懸浮細胞瞬時轉染操作流程（以24孔板轉染為例）A.細胞接種:1.轉染前24小時左右對細胞進行轉接，接種密度約為每孔0.3~1×105個細胞；2.過夜培養(yǎng)。B.R...

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細胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成，如果生產如何處理！

1、盡可能地減少血清凍融次數(shù)。2、培養(yǎng)基無需37℃水浴。3、培養(yǎng)基保持PH值7.0-7.2。4、嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質，容器定期刷洗。5、掌握細胞傳代的時機，細胞切勿生長過老。6、一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁。7、然后，在鏡下觀察細胞培養(yǎng)生長的狀態(tài)，黑點是否游動。8、如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。9、如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況...

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細胞轉染：脂質體轉染的幾個實驗方法

實驗原理脂質體(LR)試劑是陽離子脂質體DOTMA和DOPE的混合物(1：1)。它適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細胞中，是目前條件下方面的轉染方法之一。轉染率高，優(yōu)于磷酸鈣法，比它高5-100倍，能把DNA和RNA轉染到各種細胞。用LR進行轉染時，首先需要優(yōu)化轉染條件，應找出該批LR對轉染某一特定細胞適合的用量、作用時間等，對每批LR都要做。先要固定一個DNA的量和DNA/LR混合物與細胞相互作用的時間，DNA可從1-5ug和孵育時間6h，開始，按這兩個參數(shù)繪出相應LR需...

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細胞計數(shù)與存活測試實驗介紹

實驗材料0.4%w/vtrypanblue(GibcoBRL15250-061)Erythosinbluishstain取0.1gramErythrosinbluish(SigmaE-9259)及0.05grampreservativemethylparaben(SigmaH-3647)溶于100mlCa/Mgfreesaline血球計數(shù)盤及蓋玻片(Hemocytometerａndcoverslip)計數(shù)器(counter)低倍倒立顯微鏡粒子計數(shù)器(Coultercounte...

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